淋巴細(xì)胞研究-助力新冠肺炎科研解決方案

1月份Jasper[1]在《柳葉刀》上發(fā)表的文章中提到淋巴細(xì)胞減少癥是新冠肺炎患者的一個(gè)普遍特征，且與疾病嚴(yán)重程度和死亡率有很大的關(guān)系。3月份Guang Chen[2] 在JCI發(fā)表的文章中提到，感染SARS-CoV-2病毒后，用流式細(xì)胞術(shù)檢測病人外周血免疫相關(guān)的指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)患者的淋巴細(xì)胞絕對數(shù)下降，而且嚴(yán)重病例組比中度病例組有更低的淋巴細(xì)胞、CD4和CD8絕對細(xì)胞數(shù)，嚴(yán)重病例組的CD4+T細(xì)胞分泌更少的IFN-γ，如圖1所示。隨后Irani[3]在Nature Medicine發(fā)表的文章報(bào)道了一個(gè)中輕度的新冠肺炎患者，觀察發(fā)病后7-9天（病毒清除期）至13-20（恢復(fù)期）T淋巴細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化。發(fā)現(xiàn)和同期的健康人相比，雖然淋巴細(xì)胞數(shù)還處于正常水平，但是病毒清除期的T淋巴細(xì)胞表達(dá)較高的CD38和HLA-DR活化分子，且活化的CD8+T細(xì)胞分泌更多的穿孔素、顆粒酶A和B，如圖2所示。說明了在感染SARS-CoV-2病毒后，患者外周血中T淋巴細(xì)胞比例下降，同時(shí)也處于活化的狀態(tài)。

可是T淋巴細(xì)胞數(shù)量為什么減少呢？2003年Tasker[4]在BMJ發(fā)表的文章中提到，淋巴細(xì)胞減少癥為SARS的一個(gè)顯著性特征，而凋亡可能是淋巴細(xì)胞減少的一個(gè)原因。今年2月份Bo Diao[5]在medRxiv上預(yù)發(fā)表的文章里提到新冠肺炎患者中出現(xiàn)T淋巴細(xì)胞減少和耗竭。至于SARS-CoV-2病毒感染中患者淋巴細(xì)胞減少的具體原因，需要科學(xué)家們進(jìn)一步探索，為我們更好地闡述其免疫機(jī)制。

圖1：不同細(xì)胞亞群的絕對細(xì)胞數(shù)和IFN-γ表達(dá)量在嚴(yán)重病例組和中度病例組中的比較

圖2：新冠肺炎患者疾病進(jìn)展期免疫細(xì)胞的變化。（a圖）CD8和CD4+T細(xì)胞活化分子（b圖）活化的CD8和CD4+T細(xì)胞分泌的穿孔素和顆粒酶在新冠肺炎疾病進(jìn)展期和健康對照組中的比較

Irani[3]在Nature Medicine發(fā)表的文章也觀察了新冠肺炎患者在病毒清除期和恢復(fù)期B淋巴細(xì)胞的變化。分離SARS-Cov-2病毒感染Vero細(xì)胞，體外培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)恢復(fù)期患者上清中IgG和IgM含量有所增加?？贵w分泌細(xì)胞（ASCs）在第8天（病毒清除期）達(dá)到峰值，循環(huán)濾泡輔助性T細(xì)胞（cTfh）隨著疾病的進(jìn)程其比例也在增加，如圖3所示。說明感染SARS-CoV-2病毒后，患者B淋巴細(xì)胞比例增加，大量的漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體，且在體內(nèi)存活一定的時(shí)間來清除新冠病毒。

因此，科學(xué)家們提取康復(fù)患者的血漿來治療新冠肺炎患者，對于急重癥患者確實(shí)看到有一定療效，但是面臨著安全性和有效性的問題。而且B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體種類非常多，只有中和抗體才能有效地清除病毒，因此篩選出新冠病毒的特異性抗體仍是目前科學(xué)家面臨的難題。目前有幾個(gè)研究團(tuán)隊(duì)已經(jīng)開始了篩選高效抗體的研究，比如北京大學(xué)謝曉亮團(tuán)隊(duì)正在通過體外分選記憶性B細(xì)胞，進(jìn)行單細(xì)胞RNA測序的方法，用ELISA篩選與病毒表面S蛋白和RBD（受體結(jié)合域）高強(qiáng)度特異性結(jié)合的抗體。相信在不久的時(shí)間里，科學(xué)家們一定能成功篩選和研制出中和抗體來治愈新冠肺炎。

圖3：ASCs（CD3-CD19+CD27hig+CD38hig）和PD-1+ICOS+Tfh+細(xì)胞的百分比在新冠病毒進(jìn)展期和健康對照組中的比較